志賀氏菌是一種導(dǎo)致痢疾的病原體,能通過(guò)食物、水和接觸傳播引起嚴(yán)重的胃腸道疾病。由于其快速傳播的特性,準(zhǔn)確地從臨床和環(huán)境樣品中檢測(cè)出志賀氏菌對(duì)于控制疾病的爆發(fā)和防止蔓延至關(guān)重要。
志賀氏血清學(xué)檢測(cè)便是識(shí)別和亞型這種病原體的有效工具。
在臨床樣品的檢測(cè)中,通常首先采用培養(yǎng)方法對(duì)疑似含菌樣本進(jìn)行增殖。這涉及將樣品涂抹于合適的培養(yǎng)基,如麥康凱培養(yǎng)基,隨后在適宜的溫度下培養(yǎng)以促使細(xì)菌生長(zhǎng)。培養(yǎng)后,利用專門的生化試驗(yàn)和血清學(xué)測(cè)試來(lái)確認(rèn)志賀氏菌的存在。
志賀氏血清學(xué)檢測(cè)主要基于抗原-抗體反應(yīng)的原理。一種常用的方法是玻片凝集法,該方法使用特異性抗體來(lái)檢測(cè)樣品中是否存在相應(yīng)的志賀氏菌抗原。通過(guò)觀察是否形成可見(jiàn)的抗原抗體復(fù)合物來(lái)判定結(jié)果。此外,還有免疫熒光法、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定等更敏感的技術(shù)可用于檢測(cè)和鑒定特定的志賀氏菌血清型。
環(huán)境樣品的檢測(cè)則更為復(fù)雜,因?yàn)橹举R氏菌在環(huán)境中的存在可能非常局部化,且濃度較低。環(huán)境樣品如廢水、河流水樣或土壤樣品通常首先需要通過(guò)過(guò)濾或濃縮來(lái)提高細(xì)菌的濃度。這一步驟之后,細(xì)菌會(huì)被置于富營(yíng)養(yǎng)的培養(yǎng)基中增殖,以便進(jìn)行后續(xù)的血清學(xué)測(cè)試。
在環(huán)境監(jiān)測(cè)中,多價(jià)抗體試劑盒被廣泛用于篩查和識(shí)別多種志賀氏血清型。這些試劑盒通常包含多種針對(duì)不同志賀氏菌表面抗原的抗體,能夠同時(shí)檢測(cè)多個(gè)血清型。陽(yáng)性樣本需要進(jìn)一步通過(guò)特異性單價(jià)抗血清進(jìn)行確認(rèn)和血清型分型。
盡管傳統(tǒng)的培養(yǎng)和血清學(xué)方法在檢測(cè)志賀氏菌方面已得到廣泛應(yīng)用,但分子生物學(xué)技術(shù),如聚合酶鏈反應(yīng),因其高靈敏度和特異性正日益成為主流。這些技術(shù)能夠直接從樣品中檢測(cè)志賀氏菌的遺傳物質(zhì),而無(wú)需等待細(xì)菌增殖。